• T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。(2) 为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含 的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代)。(3) 为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T代播种在含 的培养基上,获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与 植株进行杂交,再自交 代后统计性状分离比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取 植株的DNA,用限制酶处理后,再用 将获得的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取 作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。试题及答案-解答题-云返教育

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      T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为代)。
      (1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除
      ,因为后者产生的  会抑制侧芽的生长。
      (2) 为筛选出已转化的个体,需将T
      代播种在含  的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代)。
      (3) 为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T
      代播种在含  的培养基上,获得所需个体。
      (4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与
        植株进行杂交,再自交  代后统计性状分离比。
      (5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,
      从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性
       
      (6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取
        植株的DNA,用限制酶处理后,再用  将获得的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取  作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

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