见解析
（1）构建基因表达载体时，需要用同种限制酶切割目的基因和载体，使之产生相同的粘性末端；用DNA连接酶可以将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来。
（2）基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因等四部分组成。
（3）动物细胞培养时，常用胰蛋白酶处理贴壁的细胞，使之相互分离，以利于传代培养。
（4）检验目的基因是否表达，常用分子杂交法。从被导入目的基因的细胞内提取RNA，与目的基因单链杂交，如果出现杂交带，说明目的基因已转录；由图2知，当let-7基因转录出来的miRNA与癌基因RAS转录出的mRNA杂交时，就会抑制RAS蛋白的产生，故肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中RAS蛋白含量减少引起的。
